1. Следует ли сразу удалять ДМСО при размораживании пробирок для замораживания клеток для культуры?
За исключением некоторых клеток, чувствительных к ДМСО, большинство клеточных линий (включая суспензионные клетки) следует размораживать и помещать непосредственно в угловой флакон с 10-15 мл свежей среды, а на следующий день заменять ее свежей средой для удаления ДМСО, чтобы большинство размороженных клеток не росло и не прилипало к культуре.
Могу ли я использовать среду, отличную от исходных условий культивирования?
Нет. Для каждой линии клеток существуют свои специфические условия культивирования. Если мы вдруг используем среду, отличную от исходных условий культивирования, большинство клеток не смогут сразу адаптироваться к ней, в результате чего клетки не смогут выжить.
3、Как разморозить замороженные пробирки?
После извлечения замороженных пробирок их следует немедленно разморозить в водяной бане при температуре 37 °C. Осторожно встряхните пробирки, чтобы они полностью растаяли в течение 1 минуты, и убедитесь, что поверхность воды не превышает края крышки пробирки, иначе может произойти загрязнение. При оттаивании пробирок из резервуара с жидким азотом необходимо следить за тем, чтобы пробирки не лопнули.
Могу ли я использовать сыворотку, отличную от исходных условий культивирования?
Нет, это невозможно. Сыворотка является чрезвычайно важным источником питательных веществ для клеточной культуры, поэтому тип и качество сыворотки оказывают большое влияние на рост клеток. Сыворотки разных видов отличаются по количеству веществ или молекул, или по их содержанию, и неправильное использование сыворотки часто приводит к гибели клеток.
5、Что такое FBS, FCS, CS, HS?
FBS (фетальная бычья сыворотка) и FCS (фетальная телячья сыворотка) имеют одинаковое значение, оба они относятся к фетальной бычьей сыворотке, FCS - неправильное слово, пожалуйста, не используйте его снова, CS (телячья сыворотка) относится к телячьей сыворотке, HS (лошадиная сыворотка) относится к лошадиной сыворотке.
6. каковы ингредиенты среды для замораживания клеток?
Наиболее часто используемая среда для криоконсервации клеток животных представляет собой однородную смесь 5 - 10 % ДМСО (диметилсульфоксида) и 90 - 95 % исходной свежей среды, использовавшейся для выращивания клеток. Примечание: Поскольку при разбавлении ДМСО выделяет много тепла, его не следует добавлять непосредственно в культуру клеток, а необходимо подготовить перед использованием.